红花石蒜ISSR-PCR反应体系的建立

编号 zgly0000401799

文献类型 期刊论文

文献题名 红花石蒜ISSR-PCR反应体系的建立

学科分类 220.5010;园林植物学

作者 杨志玲  冯刚利  谭梓峰  栾启福  王承南 

作者单位 中国林业科学研究院亚热带林业研究所  中南林学院资源与环境学院 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2006,19(4)

页码 509-512

年份 2006 

分类号 S682.29 

关键词 红花石蒜  叶片  ISSR-PCR 

文摘内容 以红花石蒜叶片基因组DNA为模板, 分析了模板DNA、引物、dNTPs、Mg^2+的浓度及Taq DNA聚合酶的用量对ISSR-PCR扩增结果的影响。建立了石蒜ISSR分析最优化的反应体系及应用程序: 即25μL反应体系中, 有20ng模板DNA、0.5μmol·L^-1随机引物、150μmol·L^-1 dNTPs、2.0mmol·L^-1 Mg^2+、1.0U Taq DNA聚合酶。反应程序为: 94℃预变性5min; 然后45个循环: 每个循环94℃变性45s, 55℃退火60s, 72℃延伸2min; 循环结束后72℃延伸7min。