FISH-FCM方法检测酵母-细菌二元体系中微生物数量

编号 zgly0001347465

文献类型 期刊论文

文献题名 FISH-FCM方法检测酵母-细菌二元体系中微生物数量

作者 张燕燕  陈进军  郑少奎 

作者单位 北京师范大学环境学院水环境模拟国家重点实验室 

母体文献 生态学报 

年卷期 2008年10期

年份 2008 

分类号 X703 

关键词 荧光原位杂交  流式细胞术  微生物计数  酵母  细菌  超声 

文摘内容 以废水生物处理系统和生物发酵系统出现的酵母-细菌二元体系作为研究对象,探讨了二元体系生物样品的最佳超声分散条件以及同时检测酵母和细菌数量时荧光原位杂交(FISH)-流式细胞术(FCM)技术的测量精度。染色-FCM检测表明:同时适用于混合酵母样品(酵母假菌丝)和混合细菌样品(活性污泥絮体)的最佳超声分散条件为100W、60~90s,但过强超声条件(120s)对酵母Candida tropicalis纯培养物(或细菌Escherichia coli纯培养物)的超声粉碎效果完全不同于混合酵母样品(或混合细菌样品)。在此基础上,以C.tropicalis和E.coli分别作为酵母和细菌的模式微生物,采用双探针杂交的FISH-FCM技术检测了背景微生物(C.tropicalis或E.coli)浓度为107个/ml时二元体系中目标微生物(102~107个/ml)的数量。流式细胞仪能够明显区分噪音和二元体系中的酵母和细菌,因而一次进样时能够同时分析两种微生物数量,并且目标微生物浓度可以精确到104个/ml,此时微生物含量仅为0.1%,其中细菌浓度甚至可以精确到103个/ml(相应含量仅为0.01%)。然而,当二元体系中目标微生物浓度过低时(<104个酵母/ml或<104个细菌/ml),背景微生物的存在会严重影响FISH-FCM技术的测量准确性。