甘薯褪绿矮化病毒RNase3蛋白的原核表达及抗血清制备

编号 zgly0001633703

文献类型 期刊论文

文献题名 甘薯褪绿矮化病毒RNase3蛋白的原核表达及抗血清制备

作者 秦艳红  乔奇  王爽  张德胜  王永江  田雨婷  张振臣 

作者单位 河南省农业科学院植物保护研究所河南省农作物病虫害防治重点实验室农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室 

母体文献 植物保护 

年卷期 2018年03期

年份 2018 

分类号 S435.31 

关键词 甘薯褪绿矮化病毒  RNase3基因  原核表达  抗血清 

文摘内容 以本实验室保存的重组质粒为模板,利用PCR方法扩增获得了甘薯褪绿矮化病毒SPCSV的RNase3基因,RNase3基因由690个核苷酸组成,编码229个氨基酸。将RNase3基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE分析。结果表明,RNase3在大肠杆菌中能高效表达,融合蛋白分子量约为26.5kD。以表达的融合蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPCSV-RNase3的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清对RNase3融合蛋白的效价达10万倍。