拟南芥细胞异三聚体G蛋白的分离纯化

编号 zgly0000578621

文献类型 期刊论文

文献题名 拟南芥细胞异三聚体G蛋白的分离纯化

作者 谢虹  杨飞武  郭莹  梁建生 

作者单位 扬州大学生物科学与技术学院 

母体文献 广西植物 

年卷期 2008,28(2)

页码 269-272,147

年份 2008 

分类号 Q946.1 

关键词 拟南芥  异三聚体G蛋白  亚基  纯化 

文摘内容 以拟南芥哥伦比亚Columbia(Col—O)野生型悬浮培养细胞为材料，采用超声波破碎、匀浆、离心、40％～60％饱和度硫酸铵分步沉淀、Sephadex G-25脱盐、DEAE—Sepharose Fast Flow离子交换、Sephadex G-200凝胶过滤，最后经过Sepharose CL-6B得到纯化的目的蛋白，蛋白收率为0．097％。纯化的蛋白质经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定显示为一条带，经Western blotting证实为G蛋白。把经Native—PAGE鉴定的蛋白质的条带回收，进行SDS—PAGE显示有3条带。一条是Gα亚基，其分子量为60kDa左右；另外2条带分子量为45kDa和35kDa，可能是β、γ亚基，初步证实拟南芥中存在异三聚体G蛋白。G蛋白提取方法的建立为在基因突变型拟南芥中G蛋白功能的研究奠定基础。