巴氯芬人工抗原的合成及其鼠源多克隆抗体的制备

编号 zgly0001733330

文献类型 期刊论文

文献题名 巴氯芬人工抗原的合成及其鼠源多克隆抗体的制备

作者 王耀  曹金博  胡骁飞  段张秀  庞杏豪  孟继秋  孙亚宁  曹夕丹  陈秀金  李兆周 

作者单位 河南科技大学食品与生物工程学院  河南省农业科学院动物免疫学重点实验室  西北农林科技大学动物医学院  新乡市动物卫生监督所 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2021,(11)

页码 1-7

年份 2021 

分类号 S852.4 

关键词 巴氯芬  人工抗原  多克隆抗体  ELISA 

文摘内容 [目的]合成巴氯芬(baclofen,BA)人工抗原并制备其多克隆抗体,为巴氯芬免疫学快速检测方法的建立奠定基础。[方法]采用碳二亚胺(EDC)法将BA分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原BA-BSA和包被抗原BA-OVA,通过紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定其偶联效果。将免疫抗原BABSA免疫BALB/c小鼠,利用间接ELISA、间接竞争ELISA及交叉反应试验分别对所获多克隆抗体的效价、敏感性、特异性等免疫学特性进行鉴定。[结果]紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳结果表明人工抗原偶联效果良好。ELISA结果表明,多克隆抗体的效价达到1:256 00,半数抑制浓度(IC_(50))为22.33 ng/mL,且与巴氯芬结构类似物及其他瘦肉精类药物(γ-氨基丁酸、氯丙那林、可乐定、赛庚啶、克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺)交叉反应率均小于0.3%,具有良好的敏感性和特异性。[结论]成功合成了巴氯芬人工抗原,并制备了免疫学特性良好的巴氯芬鼠源多克隆抗体。