编号
zgly0001420067
文献类型
期刊论文
文献题名
利用amiRNA技术沉默矮牵牛查尔酮合成酶基因
作者单位
西南大学园艺园林学院
南方山地园艺学教育部重点实验室
重庆市花卉工程技术中心
母体文献
园艺学报
年卷期
2012年12期
年份
2012
分类号
S681.9
关键词
矮牵牛
基因沉默
amiRNA
查尔酮合成酶基因
文摘内容
转基因介导的基因沉默技术是进行基因功能分析和利用基因工程改良作物的重要手段。在植物中,amiRNA(artificial microRNA)是具有高度特异性的基因沉默技术。根据amiRNA设计的原则设计了用于沉默矮牵牛查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因的amiRNA:amiRchs1,用拟南芥miR319a的前体作为表达amiRchs1的骨架,重叠PCR扩增,将天然miR319a序列替换成amiRchs1,合成的DNA片段置于35S启动子之后,转化导入矮牵牛。转基因植株花色变淡,花冠出现弥散的白色斑点或不规则的白色斑块,严重的几乎呈纯白色,花色素苷含量明显下降,CHS的mRNA含量明显降低,表明拟南芥miR319a的前体作为表达amiRNA的骨架在矮牵牛中可行,且能有效沉默结构基因。