表达绿色荧光蛋白基因的花鲈胚胎干细胞株的建立及其体外分化

编号 zgly0000476922

文献类型 期刊论文

文献题名 表达绿色荧光蛋白基因的花鲈胚胎干细胞株的建立及其体外分化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 陈松林  刘洋  沙珍霞 

作者单位 中国海洋大学海洋生命学院  中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔光资源可持续利用重点开放实验室 

母体文献 中国生物学文摘 

年卷期 2006,20(7)

页码 2-2

年份 2006 

分类号 Q943.2  Q813 

关键词 脂质体  绿色荧光蛋白  胚胎干细胞  转化  体外分化 

文摘内容 以带有绿色荧光标记的基因(pCMV-EGFP)为报告基因, 用Genejammer、Genejuice和Metafeetene三种脂质体介导花鲈胚胎干细胞(IJES1)的基因转移。实验发现, Genejammer介导的细胞转化效率最高, 高达2713%, 其余分别为12.1Vo和513%。转移绿色荧光蛋白(GFP)基因的IJES1细胞经过药物筛选和单克隆化培养, 获得了表达GFP基因的阳性克隆细胞株, 经PCR对GFP阳性细胞株的基因组DNA及提取的RNA扩增, 获得了目的祭带, 证实了GFP基因已经整合到LIES1细胞的基因组中, 并获得了正常的表达。通过体外诱导, GFP阳性细胞能够分化为神经细胞、肌肉细胞、成纤维细胞等, 用悬滴法培养获得了GFP阳性细胞的拟胚体, 证实了经过长期的药物筛选后, LJES1细胞仍然保持着发育的多能性。这一研究, 为进一步利用海水鱼类胚胎干细胞进行遗传操作及基因工程的研究提供了方法上的探索。