球孢白僵菌凝乳弹性蛋白酶(BbPr1)的纯化与特性

编号 zgly0000206553

文献类型 期刊论文

文献题名 球孢白僵菌凝乳弹性蛋白酶(BbPr1)的纯化与特性

学科分类 220.10;林业基础学科

作者 杨星勇  王中康  夏玉先 

作者单位 西南农大生物技术中心 

母体文献 菌物系统;北京 

年卷期 2000, 19(2)

页码 254～260

年份 2000 

分类号 S718.743.1 

关键词 昆虫病原真菌  球孢白僵菌  致病机理 

文摘内容 以几丁质为底物, 加入基本盐培养基中, 诱导球孢白僵菌产生分解昆虫
表皮的蛋白酶。诱导物中, 蝉蜕诱导的蛋白酶总活性、比活较高, 经超滤、
离子交换层析、亲和层析、制备性IEF电洗脱纯化了一种有凝乳弹性蛋白酶
(Pr1)活性的蛋白酶BbPr1。经SDS-PAGE电泳银染后呈单带, HPLC凝胶过滤显
示单峰。BbPr1为单体酶, 分子量为33.6 kD左右, pI为7.4。底物专一性测定
显示, BbPr1能水解Phe或Leu形成的酰胺键和肽键。BbPr1可被PMSF抑制, 表
明其活性中心有Ser残基; BbPr1还可被胰蛋白酶抑制剂TPCK和凝乳弹性蛋白
酶抑制剂TEI等所抑制; 胰蛋白酶抑制剂Leupeptin和Epianstatin, 及胃蛋白
酶抑制剂Pepstain对BbPr1活性无影响。还研究了BbPr1的最适作用pH和pH稳
定性。图3表4参15