LFY基因双T-DNA植物表达载体的构建

编号 zgly0000405496

文献类型 期刊论文

文献题名 LFY基因双T-DNA植物表达载体的构建

学科分类 220.5010;园林植物学

作者 孙磊  张启翔 

作者单位 北京林业大学园林学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2006,4(2)

页码 205-208

年份 2006 

分类号 S681.99  Q943.2 

关键词 LFY基因  双T-DNA  植物表达载体  无选择标记 

文摘内容 LFY基因是从从野生型拟南芥中克隆出的一个与调控花分生组织启动相关的基因, 它有促进植物提早开花的作用。用PCR方法从克隆载体上扩增出LFY基因并在两端添加XhoⅠ酶切位点, 将其连接在用XhoⅠ切除了hyg基因的pCAMBIA130l表达载体上, 得到去除选择标记的LFY基因植物表达载pCAM-BIAl301-LFY。质粒pCAMBIA1301经HindⅡ/EcoRⅠ双酶切补平自连后得到去除多克隆位点的质粒pCAMBIA1301^-, 再经SacⅡ/SphⅠ双酶切后插入到经SacⅡ酶切的pCAMBIA1301-LFY中。建成双T-DNA植物表达载体pCAMBIA1301-LFY-hyg^-, 经酶切鉴定证明了所构建载体的正确性。将此双T-DNA载体用农杆菌介导法转化菊花叶片, 期望得到无选择标记含LFY基因的转基因菊花。