苜蓿花药悬浮培养体系的建立及其影响因素

编号 zgly0001382634

文献类型 期刊论文

文献题名 苜蓿花药悬浮培养体系的建立及其影响因素

作者 姚喜红  魏臻武  耿小丽 

作者单位 甘肃农业大学草业学院  草业生态系统教育部重点实验室中-美草地畜牧业可持续发展研究中心  扬州大学动物科学与技术学院 

母体文献 草地学报 

年卷期 2010年03期

年份 2010 

分类号 S541.9 

关键词 苜蓿  悬浮培养  接种量  2  4-D浓度  蔗糖浓度 

文摘内容 苜蓿(Medicago sativa L.)花药悬浮培养体系的建立可为苜蓿体细胞杂交、遗传转化以及获得苜蓿单倍体,建立苜蓿加倍单倍体群体(DH)提供快捷有效的途径。采用固-液培养基结合的方式建立苜蓿花药悬浮培养体系,通过探索体系建立的基础条件及其影响因素,可建立适宜的苜蓿花药悬浮培养体系。结果表明,苜蓿悬浮培养体系中,基本液体培养基为NB培养基,培养液最佳组合为NB+2,4-D 0.3 mg.L-1+NAA 0.3 mg.L-1,蔗糖2%;建立苜蓿花药悬浮细胞系,应选取淡黄色或乳白色,结构疏松,颗粒状胚性愈伤组织为悬浮培养的基础材料;苜蓿花药悬浮细胞系继代周期为6~8 d;苜蓿花药悬浮培养时初始接种量为2 g/30 mL时悬浮细胞PCV、鲜重以及干重的增殖倍数最高,增殖倍数均超过4倍;植物生长调节剂2,4-D的添加浓度以0.3 mg.L-1为宜;糖作为组织培养过程中唯一的碳源,在苜蓿细胞悬浮培养体系中应有一定的浓度范围。因此,苜蓿花药悬浮培养中,蔗糖浓度为2%-3%时效果最好。