中国野生毛葡萄白粉菌诱导响应VqAP基因的克隆及表达分析

编号 zgly0000823913

文献类型 期刊论文

文献题名 中国野生毛葡萄白粉菌诱导响应VqAP基因的克隆及表达分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 牛姣  王西平 

作者单位 西北农林科技大学园艺学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2013(2)

页码 101-107

年份 2013 

分类号 S663.1 Q786 

关键词 中国野生毛葡萄  天冬氨酸蛋白酶(AP)  VqAP基因  表达分析 

文摘内容 【目的】:克隆中国野生毛葡萄＂商-24＂天冬氨酸蛋白酶(AP)基因的cDNA序列,明确其在葡萄抗病防御机制中的作用。【方法】:在前期获得的中国野生毛葡萄株系＂商-24＂AP基因(VqAP)EST序列的基础上,采用RT-PCR克隆AP基因的cDNA序列,对其序列及编码产物进行生物信息学分析,并通过实时定量PCR和半定量PCR,分析VqAP基因在白粉菌诱导不同时间(0,6,12,24,48,72,96和120h),不同激素(100μmol/L水杨酸,50μmol/L乙烯和0.5g/L茉莉酸甲酯)刺激及不同组织(嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须)中的表达情况。【结果】:序列分析表明,VqAP基因序列长度为1 377bp,具有开放阅读框,编码458个氨基酸残基,相对分子质量为50.48ku,等电点为8.73。保守结构域分析表明,VqAP编码产物含有2个保守的具有催化活性的天冬氨酸残基,位于Asp-Thr/Ser-Gly(DT/SG)结构域,该基因编码的氨基酸序列属于植物天冬氨酸蛋白酶A1家族,为非典型的天冬氨酸蛋白酶。荧光定量PCR结果表明,接种白粉菌后6h,VqAP基因表达量为0h的6倍多,之后迅速下调;不同激素处理后,该基因也均诱导表达,这可能是由于VqAP基因参与了植物早期的抗病反应,以及由不同激素诱导的发病相关基因的调节作用。半定量PCR结果表明,在葡萄嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须等不同组织中VqAP基因的表达量不同,这可能与它参与了植物不同组织中功能蛋白的合成与降解有关。【结论】:VqAP的表达响应病原菌侵染并受生物胁迫相关激素的调控,可能在葡萄防御病原菌侵染的机制中发挥重要作用。