黄粉甲抗冻蛋白AFP84a原核表达条件的优化和纯化

编号 zgly0001400448

文献类型 期刊论文

文献题名 黄粉甲抗冻蛋白AFP84a原核表达条件的优化和纯化

作者 闫清华  康静  杨理  邵强 

作者单位 新乡医学院生命科学技术系  河南科技学院实验中心  河南师范大学生命科学学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年05期

年份 2011 

分类号 Q51 

关键词 抗冻蛋白  表达条件  优化  亲和纯化 

文摘内容 为纯化黄粉甲抗冻蛋白AFP84a,对已构建的重组大肠埃希菌TBI诱导表达,对诱导温度、初始菌浓度I、PTG浓度及诱导时间等表达条件进行优化后,纯化该重组蛋白。通过分析比较,建立了目的蛋白表达的最优条件:温度25℃,初始菌OD600=0.6;IPTG终浓度0.5 mmol/L,时间8 h。SDS-PAGE及Bandscan4.3软件分析表明,融合蛋白含量超过总可溶蛋白的40%。融合蛋白经Amylose柱亲和纯化,Factor Xa酶切,电泳显示获得的目的蛋白呈单一条带。本研究结果为进一步对抗冻蛋白的性质和应用研究提供了有用的实验材料。