百脉根农杆菌快速高效遗传转化体系的建立

编号 zgly0000476265

文献类型 期刊论文

文献题名 百脉根农杆菌快速高效遗传转化体系的建立

作者 刘建利  张占路  吴燕民  唐益雄  郭蔼光  陈两桂 

作者单位 中国农业科学院生物技术研究所  西北农林科技大学生命科学院  西北第二民族学院生命科学系  中国农业大学食品科学与营养工程学院  深圳市农科集团 

母体文献 草业学报 

年卷期 2006,15(3)

页码 128-131

年份 2006 

分类号 S541.03  Q943 

关键词 百脉根  遗传转化  根癌农杆菌  GUS基因 

文摘内容 以百脉根品种“里奥”作为受体材料, 以GUS基因为报告基因。研究了影响农杆菌介导的百脉根遗传转化的几种因素及表面活性剂(PEG4000)、真空处理和乙酰丁香酮对提高转化效率的影响, 建立了农杆菌介导的百脉根快速高效遗传转化体系, 并获得了转基因抗性苗。结果表明, 以子叶(带叶柄)为外植体, 在OD600为0.5的菌液中, 加入150mg/L的PEG4000, 真空度6×10^-2Pa, 抽真空12min, 共培养3d, 转入含卡那霉素50mg/L和羧苄青霉素300mg/L的分化培养基中, 约20d后。50%的外植体分化不定芽, 生根成苗。PCR初步检测表明有83%的植株为GUS阳性, 转化率约为42%。