棉铃虫细胞色素P450 CYP6B7基因的克隆与融合表达

编号 zgly0000472381

文献类型 期刊论文

文献题名 棉铃虫细胞色素P450 CYP6B7基因的克隆与融合表达

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 马彩霞  李梅  邱星辉  何凤琴  刘惠霞 

作者单位 中国科学院动物研究所  西北农林科技大学农药研究所 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2006,49(6)

页码 944-949

年份 2006 

分类号 Q965.9 

关键词 棉铃虫  细胞色素P450  CYP687  基因克隆  融合表达 

文摘内容 细胞色素P450 CYP687被推测与棉铃虫Helicoverpa armigem对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性有关, 但至今尚无CYP687参与杀虫剂代谢方面的直接证据。为揭示CYP687的代谢功能, 作者以棉铃虫幼虫基因组DNA为模板, 以CYP687基因设计特异性引物, 扩增出包含321bp内含子的CYP687基因。用反向PCR的方法消除内含子, 获得包含完整的CYP687基因的开放阅读框。将CYP687基因与pMAL-c2X载体连接, 并转化E.coliTB1细胞, 在IPTG诱导下, CYP687能与载体基因编码的麦芽糖结合蛋白(MBP)在大肠杆菌中融合表达, 表达产物经直链淀粉(amylose)柱亲和层析分离洗脱后, 得到SDS-PAGE电泳纯的融合蛋白。