拟南芥蛋白激酶SnRK1.1的激酶活性分析

编号 zgly0001566452

文献类型 期刊论文

文献题名 拟南芥蛋白激酶SnRK1.1的激酶活性分析

作者 袁敏  邢继红  王莉  葛伟娜 

作者单位 华北理工大学生命科学学院基因组学与计算生物学研究中心  河北农业大学真菌毒素与植物分子病理学实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2017年08期

年份 2017 

分类号 Q946 

关键词 蛋白激酶SnRK1.1  融合蛋白  底物  免疫沉淀  激酶活性 

文摘内容 本研究分别纯化了细菌内的蛋白激酶SnRK1.1融合蛋白和拟南芥中的蛋白激酶SnRK1.1蛋白,使用合成的SP11多肽片段作为底物,通过体外激酶试验结合放射性同位素γ32P检测了SnRK1.1蛋白对底物SP11的磷酸化活性。与GST蛋白相比,GST-SnRK1.1融合蛋白能够显著磷酸化底物SP11多肽片段;与野生型Col-0纯化产物相比,从转基因拟南芥中免疫沉淀得到的GFP-SnRK1.1蛋白也能够显著磷酸化底物SP11多肽片段。最终,本研究成功建立了蛋白激酶SnRK1.1的体外磷酸化检测体系,为深入研究SnRK1.1的功能及其SnRKs家族成员参与调控的信号通路奠定了基础。