绵羊毛发角蛋白结合蛋白启动子的克隆与活性分析

编号 zgly0000599704

文献类型 期刊论文

文献题名 绵羊毛发角蛋白结合蛋白启动子的克隆与活性分析

作者 王春生  安铁洙  白秀娟  任洪林  柳增善 

作者单位 东北林业大学生命科学学院  东北农业大学动物科技学院  吉林大学人兽共患病研究所 

母体文献 中国兽医学报 

年卷期 2008,28(2)

页码 137-139,145

年份 2008 

分类号 S826  Q78 

关键词 角蛋白结合蛋白  启动子  分子克隆  活性分析 

文摘内容 以绵羊基因组DNA为模板克隆获得绵羊角蛋白结合蛋白基因KAP6.1启动子。将KAP6.1启动子插入到切除了CMV启动子的pAcGFP1-N1质粒中,构建了重组真核表达载体,并采用脂质体法转染传代培养绵羊皮肤成纤维细胞并检测其表达活性。结果显示：(1)KAP6.1启动子序列大小为830 bp,与GenBank上绵羊角蛋白结合蛋白的参照序列(M95719)有99.64%的同源性;与M95719相比,KAP6.1在349位点、726位点和246位点上分别存在1个C缺失、1个转换(G代替A)和1个颠换(A代替T);在438位点上具有1个依赖DNA的RNA聚合酶结合位点TATA box,但未发现具有依赖DNA的RNA聚合酶识别位点CAAT box;(2)转染24 h后,在蓝光激发下检测到细胞核附近有绿色荧光蛋白的高表达,并在48 h后逐渐减弱,而细胞质内绿色荧光蛋白的表达量增加。这一结果表明,KAP6.1启动子在绵羊皮肤成纤维细胞的表达上可能具有特异性。