昆虫小器官RNA荧光原位杂交技术

编号 zgly0001515730

文献类型 期刊论文

文献题名 昆虫小器官RNA荧光原位杂交技术

作者 陈敏  唐文倩  沈杰  王丹 

作者单位 中国农业大学昆虫学系 

母体文献 应用昆虫学报 

年卷期 2016年06期

年份 2016 

分类号 Q963 

关键词 翅芽  RNA原位杂交  基因表达与调控  trithorax  optomotor-blind 

文摘内容 【目的】在昆虫基因表达和功能研究中,RNA原位杂交技术越来越受到青睐。该技术不仅能定性定量反应基因表达的时空特异性,而且能在细胞水平上检测基因表达的调控模式。为了将该技术更好地在昆虫小器官研究中运用,我们以果蝇幼虫翅芽为例优化了改技术。【方法】解剖果蝇3龄幼虫翅芽进行原位杂交实验。【结果】我们发现影响原位杂交结果的因素十分复杂,包括取材时期,探针的合成,预杂交/杂交的时间和温度,清洗时间,适当的对照等。通过RNA荧光原位杂交实验,我们揭示了调控细胞记忆的trithorax基因在3龄翅芽广泛表达,并且受到转录因子Optomotor-blind的负调控。【结论】这一技术方法为研究昆虫小器官的基因表达和调控提供了便捷手段。