正交设计优化广藿香基因组SRAP扩增体系的研究

编号 zgly0000657077

文献类型 期刊论文

文献题名 正交设计优化广藿香基因组SRAP扩增体系的研究

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 吴友根  郭巧生  何际婵  林尤奋 

作者单位 南京农业大学中药材研究所  中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 

母体文献 江苏农业科学 

年卷期 2010(4)

页码 18-21

年份 2010 

分类号 S567.239.01 

关键词 广藿香  SRAP标记  正交试验  体系优化 

文摘内容 以改良CTAB法提取的广藿香叶片DNA为模板, 采用正交试验设计, 从Mg2+、dNTP、引物浓度和DNA聚合酶4因素3水平, 对SRAP扩增效果进行研究, 比较不同模板DNA浓度对PCR扩增的影响, 确立适合广藿香SRAP—PCR反应的最佳体系。利用SRAP—PCR优化体系对引物进行了全面筛选。结果表明: 各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响, 总体积20止的SRAP—PCR优化反应体系中含有: 2μL10×buffer、20ng模板DNA、1.5mmol/LMg2+、250μmol/LdNTP、0.3μmol/LPrimer、TaqDNA聚合酶1.5u。运用该体系对部分广藿香单株进行检验, 证明该体系稳定可靠; 以此体系为基础从90对引物中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物18对。