大字杜鹃RAPD反应体系的优化

编号 zgly0000613413

文献类型 期刊论文

文献题名 大字杜鹃RAPD反应体系的优化

学科分类 220.5010;园林植物学

作者 姬文秀  金东淳  李虎林  鲁艺 

作者单位 延边大学农学院农学系 

母体文献 延边大学农学学报 

年卷期 2009,31(1)

页码 21-25

年份 2009 

分类号 S685.21 

关键词 大字杜鹃  RAPD  反应体系  优化 

文摘内容 以大字杜鹃为材料，以改进的CTAB法提取大字杜鹃叶片总DNA，分别就模板DNA浓度，引物浓度，DNTP浓度，TaqDNA聚合酶量及镁离子浓度对大字杜鹃RAPD反应结果的影响进行研究．通过对各因子的组合比较，建立了大字杜鹃RAPD反应的优化体系，即总反应体积为25pL，其中包括10×Taq酶配套缓冲液2．5pL，模板DNA浓度50mg／L，引物浓度0．5μmol／L，dNTP浓度0．15mmol／L，TaqDNA聚合酶1U，Mg^2＋浓度2．0mmol／L，其余用重蒸馏水补足．扩增程序为94℃预变性5min，94℃变性1min，38℃退火40S，72℃延伸2min，共41个循环，72℃延伸7min．