仙茅根茎DNA的提取及其ISSR-PCR反应体系的优化

编号 zgly0001531458

文献类型 期刊论文

文献题名 仙茅根茎DNA的提取及其ISSR-PCR反应体系的优化

作者 何钢  朱丽芳  梁文斌  刘贤桂  张吉顺  荣广天  文梦维 

作者单位 中南林业科技大学生命科学与技术学院 

母体文献 经济林研究 

年卷期 2016年01期

年份 2016 

分类号 S567.239 

关键词 仙茅  根茎  DNA提取  ISSR  反应体系 

文摘内容 为了改进仙茅基因组DNA的提取方法,从而为其遗传多样性研究提供参考依据,以仙茅根茎为材料,采用CTAB法探讨了仙茅根茎DNA大量提取中CTAB浓度、PVP用量及Na Cl浓度对其DNA质量的影响情况。结果表明,仙茅根茎DNA的大量提取方法的最优组合为:CTAB的浓度为2%,PVP的加入量为0.20 g,Na Cl的浓度为4 mol/L。为了得到仙茅的最佳ISSR-PCR反应体系,以(CT)8 RG为引物,采用单因素实验与正交实验相结合的方法,得到的最优反应体系(25μL)为:1×PCR Buffer,模板DNA浓度为50 ng,Mg2+浓度为2.50 mmol/L,d NTPs浓度为0.20 mmol/L,引物浓度为0.40μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度为1.50 U。