生长分化因子5在小鼠肢体骨骼发育中的表达规律

编号 zgly0000408035

文献类型 期刊论文

文献题名 生长分化因子5在小鼠肢体骨骼发育中的表达规律

作者 张宇坤  杨述华  杨操  付德浩 

作者单位 华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科 

母体文献 中国临床康复 

年卷期 2006,10(9)

页码 81-83

年份 2006 

分类号 R681.3 

关键词 骨再生  生长物质  骨发育/生理学  胚胎  妊娠  动物 

文摘内容 目的: 检测生长分化因子5在小鼠肢芽组织的表达, 分析该基因在肢体骨骼发育中的表达变化, 从而进一步认识生长分化因子5基因在肢体发育过程中的作用。方法: 实验于2005-05/07在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。选取清洁级2—3月龄昆明种小鼠30只, 雌性20只, 雄性10只, 于每天下午6时按雌雄2: 1合笼, 次日展8时取出, 查见阴道栓者定为孕期第0.5天。分别在胚胎11.5, 12.5, 13.5, 14.5, 15.5d颈椎脱臼处死孕鼠, 无菌条件下分离出胚胎, 解剖显微镜下用眼科剪取肢芽组织备用。分别采用反转录聚合酶链反应和Western blotting免疫印迹法检测生长分化因子5在小鼠胚胎发育过程中肢芽组织mRNA和蛋白表达的变化。结果: ①小鼠胚胎肢芽组织生长分化因子5mRNA的表达: 孕11.5, 12.5,13.5, 14.5, 15.5d胚胎肢芽组织均可见一条219bp的生长分化因子5特异扩增条带, 其与β-actin吸光度的比值分别为0.521±0.023, 1.210±0.014.1.221±0.008, 0.556±0.014, 0.510±0.019。孕12.5d和孕13.5d生长分化因子5 mRNA的相对含量与孕11.5, 14.5, 15.5d相比有极显著性差异(P〈0.01)。②小鼠胚胎肢芽组织生长分化因子5蛋白的表达规律: 孕11.5, 12.5, 13.5, 14.5: 15.5d胚胎肢芽组织均观察到相对分子质量为13700的蛋白条带, 其与β-actin蛋白吸光度的比值分别为0.589±。021, 1.103±0.124, 1.112±0.041, 0.601±0.015, 0.552±0.006。孕12.5d和孕13.5d生长分化因子5mRNA的相对含量与孕11.5, 14.5.15.5d相比有极显著性差异(P〈0.01)。结论: 生长分化因子5mRNA及其蛋白表达的变化趋势一致, 在小鼠肢体骨骼发育早期阶段持续表达, 孕12.5d和孕13.5d呈高表达, 继而减弱。表明生长分化因子5是肢体骨骼发育早期的一个关键因子, 在小鼠肢体骨骼发育和关节形成中具有重要作用。