多花蔷薇总RNA提取方法

编号 zgly0000387943

文献类型 期刊论文

文献题名 多花蔷薇总RNA提取方法

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 赵小兰  苏晓华  赵梁军 

作者单位 中国农业大学观赏园艺与园林系  中国林业科学研究院林业研究所  湖北民族学院生物科学与技术学院 

母体文献 中国生物工程杂志 

年卷期 2005,25(9)

页码 89-93

年份 2005 

分类号 S791.22  S685.12 

关键词 多花蔷薇(Rosa  multiflora)  RNA提取  LiCl-尿素法  CTAB/酸酚法  RNA提取方法  蔷薇  组织总RNA  CTAB  Plant 

文摘内容       根据总RNA完整性、纯度和得率筛选出适合多花蔷薇幼嫩根、叶总RNA的提取方法。结果表明, 以CTAB/酸酚法提取的扦插苗根系总RNA、以LiCl-尿素法提取的扦插苗根、叶总RNA以及采用RNeasy Plant Mini Kit试剂盒的改进方法提取的组培苗嫩叶总RNA电泳有清晰明亮的28S、18S条带, 无降解; 其A260/A280值为1.73～2.04, 表明总RNA质量好。RT—PCR结果进一步证实所提取的总RNA能够用于分子生物学的各种下游实验。RNA得率分别为: 根系和组培苗嫩叶120—140μg/g(fw), 扦插苗嫩叶190—230μg/g(fw)。CTAB/酸酚法提取的嫩叶总RNA、SDS/酸酚法提取的根、叶总RNA有多糖污染, 且有明显降解。Total RNA isolation system(Z5111, Promega)试剂盒不适合提取多花蔷薇各组织总RNA。