黄连基因组DNA提取与RAPD-PCR体系的正交优化研究

编号 zgly0000477421

文献类型 期刊论文

文献题名 黄连基因组DNA提取与RAPD-PCR体系的正交优化研究

作者 侯大斌 

作者单位 西南科技大学生命科学与工程学院 

母体文献 西华师范大学学报: 自然科学版 

年卷期 2006,27(3)

页码 248-252

年份 2006 

分类号 Q949.746.5  Q521 

关键词 黄连  RAPD  基因组DNA  优化 

文摘内容 采用改进的SDS方法提取黄连基因组DNA, 利用正交设计研究方法建立黄连RAPD分析的PCR反应体系, 成功地进行了RAPD扩增, 筛选出黄连RAPD的最佳方案为: 25μL反应体系中包括dNTPs0.12mmol·L^-1, 引物0.2μmol·μL^-1, 模板DNA 40ng, Taq酶1U, Mg^+2mmol·L^-1, 10×buffer缓冲液2.5μL, 其余部分用无菌超纯水补平, PCR扩增循环为95℃3min, 38℃1min, 72℃ 2 min 1次循环; 94℃ 1 min, 38℃ 1 min, 72 ℃ 2min, 45次循环, 最后72℃延伸10min。