草莓原生质体分离条件的研究

编号 zgly0001316177

文献类型 期刊论文

文献题名 草莓原生质体分离条件的研究

作者 张学英  葛会波  刘艳萌  胡淑明 

作者单位 河北农业大学  河北省林业局  河北农业大学 保定  071001  石家庄  050081  保定 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2006年S2期

年份 2006 

分类号 S668.4 

关键词 草莓  悬浮细胞系  原生质体  原生质体分离 

文摘内容 本文以草莓为研究试材,对草莓原生质体分离过程中的若干影响因子如分离材料、酶液组成、酶解方式及时间、纯化时的离心力及离心时间进行了比较分析,以探讨草莓原生体分离的最佳条件,为草莓原生质体培养和融合等研究提供大量优质的原生质体。结果表明:继代5d的草莓悬浮细胞系是原生质体分离的最佳材料,其次是愈伤组织,而从组培苗叶片分离的原生质体产量和活力最低。以悬浮细胞系为分离材料的酶液组成为CPW13%甘露醇+0.5%PVP+0.1%MES+0.5%～1.0%Cellulase OnozukaR-10+0.5%MacerozymeR-10+0.05%PectolyaseY-23;以组培苗叶片及胚性愈伤组织为分离材料的酶液组成为CPW13%甘露醇+0.5%PVP+0.1%MES+1.0%Cellulase OnozukaR-10+1.0%Macerozyme R-10+0.1%Pec-tolyase Y-23。分离草莓悬浮细胞系原生质体宜采用低速(30r/min)恒温(27±1)℃摇床振荡酶解,时间为12h。纯化时,适当提高离心力的短时间离心有利于原生质体纯化过程中产量和活力的保持,以80×g离心6～8min,效果为好。