拮抗链霉菌R15β-葡萄糖苷酶的纯化及特性研究

编号 zgly0001467131

文献类型 期刊论文

文献题名 拮抗链霉菌R15β-葡萄糖苷酶的纯化及特性研究

作者 王清海  金莹  万平平  韩玉梅  李安娜  丁爱云 

作者单位 山东农业大学植物保护学院  山东省林业科学研究院森林保护与生物药物研究所  黄岛出入境检验检疫局  济南市园林局  山东菏泽市曹县环保局 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 Q946 

关键词 链霉菌  β-葡萄糖苷酶  纯化  特性  酶解产物 

文摘内容 从山东泰安郊区大白菜植株根际土壤中分离筛选获得一株拮抗链霉菌(Streptomyces spp.)R15菌株。采用固体发酵、粗酶液(NH4)2SO4分级沉淀、DEAE-52阴离子交换柱层析和Sephadex G75凝胶柱层析等步骤从链霉菌(Streptomyce spp.)R15中分离纯化获得β-葡萄糖苷酶。结果表明,纯化倍数16.28,回收率为14.59%,SDS-PAGE电泳测得相对分子量为63.89 kDa。经TLC分析酶解产物,β-葡萄糖苷酶与水杨苷反应生成D-葡萄糖和水杨醇。以水杨苷为底物时,该酶的Km值为10.644 mmol/L,Vmax为0.525μmol·L-1·min-1。该酶的最适温度为65℃,70℃以下相对稳定;最适pH为5,pH 3~7之间相对酶活在75%以上。Cu2+、Hg2+和Fe2+对酶有抑制作用,其中Hg2+和Cu2+的抑制作用最强,酶活力完全丧失;而Ca2+,Mn2+对酶均有激活作用,相对酶活分别高达137.18%和119.52%。