阔叶薰衣草芳樟醇合成酶基因的克隆与表达载体构建

编号 zgly0001461456

文献类型 期刊论文

文献题名 阔叶薰衣草芳樟醇合成酶基因的克隆与表达载体构建

作者 赵钟鑫  王健  李琴  尚啸 

作者单位 海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室  海南大学园艺园林学院 

母体文献 植物研究 

年卷期 2013年03期

年份 2013 

分类号 S573.9 

关键词 阔叶薰衣草  芳樟醇合成酶  基因克隆  序列分析  植物表达载体构建 

文摘内容 以阔叶薰衣草(Lavandula latifolia)的鲜叶为试材,通过RT-PCR技术,获得阔叶薰衣草芳樟醇合成酶基因的cDNA序列。该序列长度为1809bp,编码602个氨基酸,包含一个1809 bp的开放阅读框,与NCBI上已公布的阔叶薰衣草的芳樟醇合成酶蛋白序列相似度为98%,有21个核苷酸差异,11个氨基酸差异,将其命名为Lslis。序列分析研究表明:Lslis具有多数单萜烯类合成酶基因典型的保守结构域,即DDXXD,RRX8W和(N,D)D(L,I,V)X(S,T)XXXE;具有芳樟醇合酶活性必需的DDXXD功能基团。Lslis推导氨基酸序列的预测分子质量和等电点分别为70.36和5.66 kD;疏水性分析结果表明其大部分氨基酸区域为亲水结构,该基因为亲水多肽。Lslis和已公布的阔叶薰衣草芳樟醇合酶Lllis的蛋白二级结构预测结果表明,两者在整体结构上基本保持一致,但Lslis相对于Lllis要少一个α螺旋结构。将其连接到pMD18-T的载体上,通过中间载体pCAMBIA1303,构建了Lslis基因的植物表达载体,并将其导入农杆菌,经菌落PCR鉴定和测序结果表明该片段已插入表达载体。