水牛MD-2 cDNA基因的克隆与原核表达

编号 zgly0001400527

文献类型 期刊论文

文献题名 水牛MD-2 cDNA基因的克隆与原核表达

作者 焦寒伟  杜丽  雷明  张冬琳  郝永昌  张晓茹  匡文华  成鹰  王凤阳 

作者单位 海南大学农学院海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室(筹)海口市动物基因工程重点实验室  华中师范大学生命科学学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年09期

年份 2011 

分类号 Q785 

关键词 水牛  MD-2  克隆  原核表达 

文摘内容 为探讨水牛抵抗革兰阴性菌感染的免疫机制,克隆、表达了水牛髓样分化蛋白-2(bMD-2)基因,并用Western blot进行鉴定。采用RT-PCR方法从水牛外周血白细胞中扩增bMD-2基因,构建pET28a-bMD-2表达载体,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,bMD-2基因含有一个483 bp的开放阅读框,编码161个氨基酸;37℃条件下,经1 mmol/LIPTG诱导表达6 h后,His-bMD-2在E.coliBL21中表达量最高,并以包涵体的形式存在,融合蛋白的分子质量约为25 ku。结果表明水牛MD-2原核表达载体成功构建并表达,为继续深入对水牛MD-2基因功能的研究提供参考。