秦川牛ADIG基因重组腺病毒过表达载体的构建与病毒包装

编号 zgly0000980832

文献类型 期刊论文

文献题名 秦川牛ADIG基因重组腺病毒过表达载体的构建与病毒包装

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 张琼  姜碧杰  成功  刘扬  昝林森 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  国家肉牛改良中心 

母体文献 西北农林科技大学学报;自然科学版 

年卷期 2015(8)

页码 33-38

年份 2015 

关键词 ADIG  腺病毒  同源重组  秦川牛 

文摘内容 【目的】构建秦川牛ADIG基因的重组腺病毒载体,包装并扩繁病毒,为下一步研究该基因在脂肪细胞分化过程中的分子作用机制和相关信号通路奠定基础。【方法】根据NCBI收录的家牛ADIG基因(NM_001113720.1)mRNA序列设计引物,以秦川牛组织样提取的总RNA反转录而成的cDNA为模板,通过RT-PCR和PCR扩增获得目的基因,将其连接到pMD19-T Simple载体并测序。质粒提取纯化后通过BglⅡ与SalⅠ双酶切,然后胶回收酶切产物,将其连接到穿梭载体pAdTrack/CMV上,构建重组穿梭质粒pAdTrack/CMV-ADIG。