苦豆子赖氨酸脱羧酶基因克隆与表达分析

编号 zgly0001624372

文献类型 期刊论文

文献题名 苦豆子赖氨酸脱羧酶基因克隆与表达分析

作者 杨毅  陆姗姗  刘萍  田蕾 

作者单位 宁夏大学农学院 

母体文献 草业学报 

年卷期 2016年08期

年份 2016 

分类号 S567.239 

关键词 苦豆子  赖氨酸脱羧酶基因  基因克隆  基因表达  氧化苦参碱 

文摘内容 赖氨酸脱羧酶（lysine decarboxylase,LDC）基因是苦豆子中氧化苦参碱（oxymatrine,OMA）生物合成的第一个关键酶基因。根据近缘物种苦参的赖氨酸脱羧酶基因设计特异引物,同源克隆法克隆了苦豆子赖氨酸脱羧酶基因的蛋白质编码区序列,全长1368bp,命名为Sa-LDC,GenBank登录号为KM249871。生物信息学分析表明SaLDC编码区序列无内含子,与苦参和狗苦参的LDC序列一致性均达到97%;属于Ⅲ型5-磷酸吡哆醛依赖酶[typeⅢpyridoxal 5-phosphate（PLP）-dependent enzymes,PLPDE-Ⅲ]超基因家族,功能活跃。Sa-LDC编码455个氨基酸残基,其编码的肽链相对分子质量49.14kD,理论等电点5.63,无信号肽和跨膜结构;在其氨基酸序列中具有产喹诺里西啶生物碱的特征性保守位点Phe340;系统进化树将苦豆子与其他产喹诺里西啶类生物碱的植物聚为一类。qPCR和HPLC检测显示,苦豆子赖氨酸脱羧酶基因的表达和氧化苦参碱的积累均受干旱胁迫的影响,且基因的表达量与氧化苦参碱的积累呈正相关关系。