小黑杨PnCCH10基因的克隆、功能初步鉴定及遗传转化

编号 zgly0001691337

文献类型 期刊论文

文献题名 小黑杨PnCCH10基因的克隆、功能初步鉴定及遗传转化

作者 黄佳欢  刘关君  陈瑾元  张双  王琪  许志茹 

作者单位 东北林业大学生命科学学院  东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2019年11期

年份 2019 

分类号 Q943.2  S792.11 

关键词 小黑杨  CCH  基因克隆  表达模式  功能互补验证  遗传转化 

文摘内容 铜伴侣蛋白是细胞内结合并转运铜离子的低分子量蛋白质,在维持细胞铜稳态过程中发挥重要作用。CCH具有羧基末端伸长区,是植物细胞特有的铜伴侣蛋白。本研究通过RT-PCR方法克隆了小黑杨PnCCH10基因(登录号为MF977410)。序列分析表明, PnCCH10基因的开放阅读框为492 bp,编码的亲水性蛋白质含有163个氨基酸残基,分子量为18.7 kDa。PnCCH10蛋白的氨基端含有保守的MXCXXC铜离子结合基序且能够形成βαββαβ二级结构; PnCCH10与毛果杨PtCCH10蛋白的氨基酸序列同源性为99%,二者的进化关系最近。qRT-PCR鉴定结果显示,应答缺铜和高浓度铜离子胁迫, PnCCH10在小黑杨不同组织中的表达模式发生变化。酵母功能互补试验结果表明, PnCCH10具有抗氧化和铜伴侣功能。遗传转化后获得了过量表达PnCCH10基因的小黑杨转基因株系,且1、2、3、5、6、7和13号转基因株系的叶片和根中PnCCH10基因的表达量显著高于野生型植株。