滋阴泻火中药合剂对青春期大鼠垂体生长激素和长骨干骺端胰岛素样生长因子1基因表达的调节

编号 zgly0000447349

文献类型 期刊论文

文献题名 滋阴泻火中药合剂对青春期大鼠垂体生长激素和长骨干骺端胰岛素样生长因子1基因表达的调节

作者 及金宝  李嫔 

作者单位 上海市嘉定区安亭医院骨科  上海市交通大学附属儿童医院内分泌科 

母体文献 中国临床康复 

年卷期 2006,10(7)

页码 37-39

年份 2006 

分类号 R453 

关键词 中药学  青春期  早熟/药物疗法  动物实验荷代试验  中药疗法  促生长素/代谢  胰岛素样生长因子I/药理学  基因表达 

文摘内容 目的: 观察滋阴泻火中药合剂对青春期大鼠垂体生长激素、K骨干骺端胰岛紊样生长因子1基因表达的影响, 探讨中药对垂体。长骨干骺端促生长机能的调节作用。方法: 实验于2002—09/2003—03在上海瑞金医院完成。将青春期SD雌性大白鼠共22只分为对照组和实验组, 每组11只。对照组: 喂饲生理盐水1个月, 5mL/次, 1次/d; 实验组: 喂饲滋阴泻火中药合剂(由生地12g。炙龟板12g, 黄柏9g, 知母9g等组成; 均由上海复旦大学附属儿科医院中药制剂室煎制成浓缩合剂, 每毫升约古生药3g。)1个月, 5mL/次, 1次/d。疗程结束后, 动物处死, 取出垂体及左后肢骨干骺端, 提取总mRNA。采用实时荧光RT-PCR定量检测技术, 检测垂体生长激素mRNA, 长骨干骺端胰岛素样生长因子1mRNA表达水平。实时荧光RT-PCR定基检测方法: ①垂体、长骨干骺端总RNA提取采用一步法。并逆转录合成cDNA, PCR扩增产物经15g/L琼脂糖电泳后, 纯化, 制备标准曲线。并扩增。②垂体生长激素扩增条件: 先94℃2min, 然后94℃变性10s, 58℃退火30s。72℃延长20s, 3个步骤作为1个循环, 共扩增40个循环。长骨干骺端胰岛索样生长因子1扩增条件: 先94℃3min, 然后94℃变性10s, 60气退火20s, 72℃延长20s, 3个步骤作为1个循环, 共扩增40个循环。经过t检验处理, 比较两组间垂体生长激素及长骨干骺端胰岛索样生长因子1基因表达水平的变化, 观察滋阴泻火中药合剂对上述指标基因表达的影响。结果: 实验动物22只, 生理盐水和中药灌胃时误灌入气管窒息而死洛1只。进入结果分析20只。①实验组生长激素cDNA的复制数明最低于对照组[(7.08±1.20)×10^7, (19.38±6.69)×10^7; t=5.728, P〈0.051, 且扩增片段为1条长度为533bp的条带, 未见其他非特异性条带。②实验组干骺端胰岛素样生长因子1cDNA复制数明显低于对照组[(2.28±0.65×10^2), (21.41±5.85×10^2; t=10.268, P〈0.05]; 电泳图显示干骺端胰岛素样生长因子1cDNA扩增片段为一条长度为202bp的条带, 未见其他非特异性条带。结论: 滋阴泻火中药合剂可在转录水平调节腺垂体生长激索及长骨于骺端软骨细胞胰岛素样生长因子1的基因表达, 从而调整生长激素-胰岛素样生长因子1轴的功能活动。