松毛虫mtDNA PCR反应体系优化

编号 zgly0000682830

文献类型 期刊论文

文献题名 松毛虫mtDNA PCR反应体系优化

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 张学卫  吴丽欣  高宝嘉 

作者单位 河北农业大学林学院  河北北方学院 

母体文献 河北农业大学学报 

年卷期 2010,33(4)

页码 77-80

年份 2010 

分类号 S763.42 

关键词 松毛虫  PCR反应体系  正交设计  优化 

文摘内容 为了应用线粒体DNA研究松毛虫种群的遗传结构,本研究采用正交试验设计法L16(45)对影响松毛虫mtDNA PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg^2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验并对PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了单因素梯度比较优化。建立了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳体系即在50μL体系中含模板150 ng、0.10μmol/L引物、0.4 mmol/L dNTP、1.0UTaq DNA聚合酶、2.5 mmol/LMg^2+。同时通过PCR比较,确定最佳循环次数为35个循环,最佳退火温度为56℃,获得了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳扩增程序。