香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA4非编码区启动子活性的研究

编号 zgly0000317483

文献类型 期刊论文

文献题名 香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA4非编码区启动子活性的研究

作者 魏红艳  孙德俊  李云  孙卉  蔡文启 

作者单位 北京林业大学生物科学与技术学院  中国科学院微生物研究所 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2003,25(5)

页码 34-37

年份 2003 

分类号 S668.108 

关键词 香蕉束顶病毒中国漳州分离物  DNA  4  启动子活性  GUS  GFP 

文摘内容 应用PCR方法亚克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物(Banana bunchy top virus Chinese Zhangzhou isolate, BBTV—ZZ)DNA4非编码区(Pol)、主要共同区缺失片段(Po2)和主要共同区及茎环共同区都缺失片段(Po3), 分别插入到植物表达载体pCAMBIA 1304的gfp: : gus基因上游, 替代椰菜花叶病毒启动子(CaMV 35S), 得到重组质粒pTA2、pC26和pC45.通过Agroinfiltration法, 将含pTA2、pC26、pCA5和pCAMBIA 1304的根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)注射进烟草(Nicotiana tabacum L.cv.Xanthi NC)叶片, 进行β-葡糖苷酸酶(GUS)和绿荧光蛋白(GFP)含量的瞬间表达分析.含有pTA2、pC26、pC45、pCAMBIA1304和未注射的烟草叶片其GUS活性分别为1.007、0.852、0.939、2.069和0.021pmol·MU/(μg·min); 间接酶连免疫试验(ELISA)结果表明每毫克总蛋白中的GFP于490处的吸收值(A490)分别为89.577、65.184、72.096、100.440和3.287.以上表明Pol、Po2和Po3具有较强的启动子活性.此外, 转基因烟草的GUS组织化学定位检测试验进一步表明Pol、Po2和Po3具有维管组织特异性.。