鸡β-防御素Gal-3在转基因紫花苜蓿中的表达

编号 zgly0000807216

文献类型 期刊论文

文献题名 鸡β-防御素Gal-3在转基因紫花苜蓿中的表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 金立波  刘秀明  刘磊  刘敏  杜淑环  朱海林  王会岩 

作者单位 吉林农业大学生命科学学院生物反应器与药物开发重点实验室  吉林医药学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2012(12)

页码 177-183

年份 2012 

分类号 S852.4 

关键词 农杆菌  鸡β-防御素Gal-3  紫花苜蓿  遗传转化 

文摘内容 【目的】:在紫花苜蓿中表达鸡β-防御素3(Gal-3),为利用紫花苜蓿规模化生产Gal-3奠定基础。【方法】:PCR扩增鸡Gal-3基因,以潮霉素作为转基因植物的选择标记,将鸡β-防御素Gal-3基因克隆至表达载体pCAM-BIA1390R(简写为p1390R)上,构建重组表达质粒p1390R-Gal-3;采用冻融法将质粒p1390R-Gal-3转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化至紫花苜蓿;采用PCR检测、Southern blot筛选阳性转基因苜蓿植株,并对Gal-3蛋白进行抑菌活性研究。【结果】:PCR扩增获得了240bp的鸡Gal-3基因,成功构建植物表达载体p1390R-Gal-3,在苜蓿中初步建立了Gal-3的遗传转化体系,共获得22株转基因苜蓿植株,其中4株为阳性植株,转化率为18.2%。PCR扩增和Southern blot检测表明,Gal-3基因已整合到转基因苜蓿基因组中。提取转基因苜蓿的Gal-3蛋白进行抑菌活性试验,结果显示转基因苜蓿对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌均有抑制作用。【结论】:获得了具有抑菌活性的转鸡β-防御素Gal-3基因的苜蓿植株。