四引物扩增受阻突变体系PCR在绵羊线粒体基因组SNP检测中的应用

编号 zgly0001449170

文献类型 期刊论文

文献题名 四引物扩增受阻突变体系PCR在绵羊线粒体基因组SNP检测中的应用

作者 陈晓勇  向海  O.H.D.Brahi  敦伟涛  赵兴波 

作者单位 中国农业大学动物科技学院  河北省畜牧兽医研究所 

母体文献 中国草食动物科学 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S826 

关键词 四引物扩增受阻突变体系PCR  绵羊  线粒体  单核苷酸多态性 

文摘内容 为建立绵羊线粒体基因组SNP的四引物扩增受阻突变体系(tetra-primer amplification refractory mutation system,Tetra-primer ARMS)PCR检测方法,选择小尾寒羊线粒体T1112C和C11606T2个SNP,在等位基因特异PCR基础上,根据错配原理设计4条引物,优化PCR反应体系,采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。结果表明:T1112C位点检测中,所有个体均能扩增出569 bp最长片段的外引物产物(阳性对照),扩增出349 bp片段的个体为野生型,扩增出263 bp片段的个体为突变型。C11606T位点检测中,所有个体均能扩增出572 bp最长片段的外引物产物(阳性对照),扩增出408 bp片段的个体为野生型,扩增出213 bp片段的个体为突变型。在每个线粒体多态位点均检测到野生型和突变型2种基因型,没有发现异质性。应用Tetra-primer ARMS PCR方法,经一次PCR即可判定线粒体SNP位点的基因型,该方法快速、简便,可应用于绵羊线粒体SNP分型。