意蜂工蜂酸性磷酸酶的纯化及其酶学特性

编号 zgly0001282759

文献类型 期刊论文

文献题名 意蜂工蜂酸性磷酸酶的纯化及其酶学特性

作者 江琰  刘克武  雷远成  宋贤丽 

作者单位 贵州科学院  四川大学生命科学学院  四川大学生命科学学院 贵阳550001  成都610064  成都610064 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2004年03期

年份 2004 

分类号 Q556 

关键词 意蜂工蜂  酸性磷酸酶  分离纯化  性质 

文摘内容 从意蜂Apismellifera工蜂体内分离提纯酸性磷酸酶 (ACPase,EC3 1 3 2 ) ,并对其性质进行了研究。将工蜂酸性磷酸酶的初提物经分段盐析、DEAE SepharoseFF离子交换层析及SephadexG 2 0 0凝胶过滤等纯化步骤 ,得到经聚丙烯酰胺凝胶电泳为单一蛋白区带的酶液。提纯倍数为 77 2 4 ,酶液比活力为 16 2 2U mg(对硝基苯磷酸二钠作底物 )。利用凝胶过滤法测定酶的相对分子质量为 135kD ,SDS PAGE测定酶的亚基相对分子质量为 6 3 1kD。酶的等电点为 4 4 6和 4 79。非还原 还原 (NR R)单向、双向SDS PAGE显示酶分子含有链内二硫键。对二级结构圆二色谱分析显示 ,酶分子中α 螺旋占 13 84 % ,β 折叠占2 5 6 8% ,无规则卷曲占 5 6 34%。氨基酸组成分析结果表明 ,酸性磷酸酶约含有 5 0 7个氨基酸残基 ,富含门冬氨酸残基。