诺丽Actin基因片段克隆及实时荧光定量PCR方法的建立

编号 zgly0001573986

文献类型 期刊论文

文献题名 诺丽Actin基因片段克隆及实时荧光定量PCR方法的建立

作者 吴田  蓝增全  王华芳 

作者单位 西南林业大学园林学院  西南林业大学环境科学与工程学院  北京林业大学生物科学与技术学院 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2018年02期

年份 2018 

分类号 Q943.2  S667.9 

关键词 基因克隆  内参基因  序列分析  表达分析 

文摘内容 为了解决诺丽实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测中无内参基因的现状,根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以诺丽果实总RNA反转录成c DNA为模板,进行PCR扩增,扩增出的基因片段克隆到p MD-18T载体,阳性克隆经PCR鉴定后测序。序列结果表明:该片段长393 bp,编码131个氨基酸;所得序列与麦蓝菜actin 1有最高的一致性(96%)和相似性(98%)。q RT-PCR结果表明,诺丽Actin基因在诺丽的各个组织、果实不同发育时期都能稳定表达,且表达水平基本一致,适合在诺丽基因表达研究中作为内参基因。