维氏气单胞菌双基因PCR检测方法的建立

编号 zgly0001448821

文献类型 期刊论文

文献题名 维氏气单胞菌双基因PCR检测方法的建立

作者 王惠  边宇  孟庆峰  杨滨僮  康元环  荆琦  单晓枫  钱爱东 

作者单位 吉林农业大学动物科学技术学院  吉林出入境检验检疫局  吉林石油集团有限责任公司洮河农场 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2013年11期

年份 2013 

分类号 S852.61 

关键词 维氏气单胞菌  16SrRNA  核酸酶基因  聚合酶链反应 

文摘内容 为了建立维氏气单胞菌双基因PCR检测方法,以维氏气单胞菌ATCC35624基因组DNA为模板,选取16SrRNA和核酸酶基因为靶基因,设计2对特异性引物,建立维氏气单胞菌双基因PCR检测方法。验证方法的敏感性与特异性,同时应用该方法对模拟污染样本进行检测。检测结果显示应用PCR方法同时扩增出大小约880bp和320bp的DNA片段,通过序列比对分析,16SrRNA基因片段、exu基因片段序列与GenBank中登录的维氏气单胞菌ATCC35624株的的同源性均为99%,方法的敏感性较高,能检测到的DNA浓度达到了1.58×10-4 ng/μL,特异性较强,只有维氏气单胞菌标准株及分离株结果呈阳性;人工模拟污染试验显示,该方法的样本检出率达到了90%,高于细菌分离培养的检出率73.3%。建立的维氏气单胞菌双基因PCR检测方法可以克服传统生化鉴定的不足,为维氏气单胞菌的检测提供新的途径。