Epsps基因为筛选标记的多基因抗虫表达载体构建

编号 zgly0000560627

文献类型 期刊论文

文献题名 Epsps基因为筛选标记的多基因抗虫表达载体构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 邓力华  于元杰  李宝健  肖国樱 

作者单位 中国科学院亚热带农业生态研究所  山东农业大学农学院  中山大学基因工程教育部重点实验室 

母体文献 生物技术 

年卷期 2008,18(1)

页码 9-13

年份 2008 

分类号 Q943.2 

关键词 印秘基因  抗虫基因  植物表达载体  大分子连接 

文摘内容 目的：为了获得水稻的广谱抗虫性，同时也避免由潮霉素抗性基因引起的安全性问题。构建以抗除草剂基因(Epsps基因)为筛选标记的多基因抗虫植物表达载体pCTSK。方法：以双元载体pCAMBIA1300为基础，将潮霉素抗性基因hpt替换成携带烟草叶绿体转运肽序列TSP的草甘膦抗性突变基因aroAM12(编码细菌5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶Epsps)作为筛选标记基因，获得中间表达载体pCTSM1300。然后再连接上3个抗虫基因(马铃薯蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ、苏云金杆菌毒蛋白基因Bt cryⅠ(A)及雪花莲外源凝集素基因GM)的完整表达片段(包含各自的启动子和终止子)。结果：通过PCR方法和酶切方法鉴定已成功地构建了该表达载体；通过不同实验方案的数据分析，得出在载体构建的大分子连接中优化的一次连接法连接效率高于二次连接法的结论。