茶树ISSR-PCR反应体系的正交优化

编号 zgly0000657246

文献类型 期刊论文

文献题名 茶树ISSR-PCR反应体系的正交优化

作者 宁静  黄建安  李娟  钟兴刚  朱旗 

作者单位 湖南省茶叶研究所  茶学教育部重点实验室 

母体文献 湖南农业大学学报: 自然科学版 

年卷期 2010,36(4)

页码 414-417

年份 2010 

分类号 S603.2 

关键词 茶树  ISSR-PCR  反应体系  正交设计 

文摘内容 对茶树ISSR-PCR反应体系中的5因素(Taq酶浓度(U/(20μL))、Mg2+浓度(mmol/L)、模板DNA质量浓度(ng/(20μL))、dNTP浓度(mmol/L)、引物浓度(μmol/L))在4水平上进行正交优化试验,筛选出各因素的最佳水平,建立茶树最佳ISSR-PCR反应体系,即20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶为1.0U/(20μL),Mg2+为2.0mmol/L,模板为40ng/(20μL),dNTP为0.20mmol/L,引物为0.25μmol/L.对茶树ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,确定引物ISSR1、UBC881的最适退火温度分别为52.4、59.0℃.