牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白的原核表达及鉴定

编号 zgly0001469590

文献类型 期刊论文

文献题名 牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白的原核表达及鉴定

作者 范晴  谢芝勋  谢志勤  刘加波  庞耀珊  邓显文  谢丽基  罗思思 

作者单位 广西兽医研究所 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 S852.653 

关键词 牛病毒性腹泻病毒  NS3  原核表达  鉴定 

文摘内容 旨在制备高纯度的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3蛋白,为建立牛病毒性腹泻ELISA检测试剂盒奠定基础,用于区分疫苗免疫和野毒感染。根据GenBank中已发表的牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白NS3基因设计一对特异性引物,用PCR扩增1 206bp目的片段,克隆到pET-32a表达载体,成功构建重组质粒pET-32a-NS3。将重组质粒转化大肠埃希菌Transetta(DE3)用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析,结果表明重组NS3蛋白在体外得到较好表达,表达的融合蛋白分子质量为61ku。可溶性分析表明重组NS3蛋白以包涵体的形式存在,经镍柱His标签蛋白纯化后进行Western blot鉴定,结果表明表达的NS3重组蛋白能与BVDV的阳性血清反应。说明所制备的NS3蛋白反应性好,可用作ELISA的包被抗原。