中国木犀科苦丁茶ISSR实验条件优化的研究

编号 zgly0001372715

文献类型 期刊论文

文献题名 中国木犀科苦丁茶ISSR实验条件优化的研究

作者 郑道君  刘国民  梁远发  鄢东海  令狐昌弟  田永辉 

作者单位 海南大学热带生物资源教育部重点实验室  海南大学苦丁茶研究所  贵州省茶叶科学研究所 

母体文献 植物研究 

年卷期 2009年02期

年份 2009 

分类号 Q943 

关键词 木犀科  苦丁茶  ISSR  影响因子  体系优化 

文摘内容 系统地研究了中国木犀科苦丁茶ISSR反应体系中的主要影响因子,建立了一套稳定的ISSR-PCR反应参数。筛选出了10个有效引物,并以中国木犀科苦丁茶8个物种共21份种质材料为供试材料对优化后的反应条件的重复性、多态性进行了检测。优化后的反应体系为:10×buffer2.5μL,2.0～3.0mmol·L-1 MgCl2,150～300μmol·L-1 dNTPs,Taq酶1.0～1.5U,引物0.4～0.5μmol·L-1,DNA模板5～320ng。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性40s,50～54℃退火45s,72℃延伸120s,进行35个循环,最后72℃延伸8min。该反应条件可应用于中国木犀科苦丁茶亲缘关系和遗传多样性分析。