毛花猕猴桃种质资源ISSR反应体系的建立和优化

编号 zgly0001528832

文献类型 期刊论文

文献题名 毛花猕猴桃种质资源ISSR反应体系的建立和优化

作者 郎彬彬  黄春辉  陶俊杰  曲雪艳  吴寒  徐小彪 

作者单位 江西农业大学农学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年02期

年份 2016 

分类号 S663.4 

关键词 ISSR  毛花猕猴桃  正交试验设计  反应体系 

文摘内容 以毛花猕猴桃种质资源为试验材料,通过正交实验设计对影响ISSR反应体系各个主要因素进行优化。研究结果表明,最佳ISSR-PCR反应体系为:总体积为20μL,2μL buffer(无Mg2+),1 mmol/L Mg2+,1 U Taq酶,0.25 mmol/L d NTPs,1μmol/L引物,80 ng模版DNA;扩增程序为94℃3 min;94℃30 s,50℃~60℃退火45 s,72℃1 min(40个循环);72℃7 min,12℃保存;引物UBC842的最佳退火温度为58℃。利用该体系,用引物UBC835对46份野生毛花猕猴种质资源进行扩增,扩增结果表明建立的ISSR-PCR反应体系重复性好,稳定性强。