家蝇Mdsirt1基因在细菌、高温和重金属胁迫下的表达分析

编号 zgly0001565100

文献类型 期刊论文

文献题名 家蝇Mdsirt1基因在细菌、高温和重金属胁迫下的表达分析

作者 顾冀海  李亚静  李文倩  唐婷  柳峰松 

作者单位 河北大学生命科学学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2017年12期

年份 2017 

分类号 Q78 

关键词 家蝇  Sirtuins蛋白  免疫  热激  重金属胁迫 

文摘内容 【目的】探究家蝇Musca domestica sirt1基因（Mdsirt1）在各种胁迫条件下的表达模式。【方法】以家蝇2龄幼虫cDNA为模板,PCR扩增Mdsirt1基因序列并进行生物信息学分析;实时定量PCR（qRT-PCR）检测Mdsirt1在家蝇不同发育阶段（卵、1龄幼虫、2龄幼虫、3龄幼虫、蛹和成虫）的表达变化,2龄幼虫不同组织（表皮、肠道、脂肪体和血细胞）中的表达分布,以及胁迫条件（细菌刺激、热激及CdCl2刺激）下的转录水平变化;通过RNAi干扰Mdsirt1基因表达,观察敲低Mdsirt1表达后家蝇幼虫抗病能力变化,并检测机体氧化应激水平。【结果】家蝇Mdsirt1基因编码蛋白含有SIR2结构域,与厩螫蝇Stomoxys calcitrans SIR2氨基酸序列一致性为66%。qRT-PCR结果显示,Mdsirt1基因主要在家蝇蛹期表达,在家蝇2龄幼虫脂肪体中表达量较高。家蝇幼虫Mdsirt1分别在大肠杆菌Escherichia coli刺激3 h,金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus刺激6 h,42℃热激30min以及30 mmol/L CdCl2刺激48 h时表达量达到最高峰。敲低Mdsirt1表达的家蝇幼虫受到细菌感染（大肠杆菌和金黄色葡萄球菌1∶1混合感染）后存活率较对照组显著降低1.47倍,且敲低Mdsirt1后机体处于氧化应激状态,活性氧自由基水平和丙二醛含量较对照组分别升高1.58和1.59倍。【结论】Mdsirt1参与家蝇幼虫的抗菌免疫应答和抗逆反应。