磺胺嘧啶单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究

编号 zgly0001370924

文献类型 期刊论文

文献题名 磺胺嘧啶单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究

作者 刘庆堂  滕曼  职爱民  刘宣兵  杨艳艳  柴书军  邓瑞广  张改平 

作者单位 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室  河南科技大学食品与生物工程学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2009年06期

年份 2009 

分类号 S859.84 

关键词 磺胺嘧啶  单克隆抗体  免疫学特性 

文摘内容 【目的】制备磺胺嘧啶(Sulfadiazine,SD)单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb),并对其免疫学特性进行检测。【方法】用重氮化法将SD偶联于载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上,合成免疫原BSA-SD和包被原OVA-SD,并用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE法进行鉴定。用BSA-SD免疫Balb/c小鼠,间接ELISA和阻断ELISA法筛选细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立SD mAb细胞株,用体内诱生腹水法制备SD mAb,对SDmAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。【结果】BSA-SD人工抗原制备成功,SD与BSA的分子结合比约为10.3∶1;筛选出6B5-E4、6B5-E9、3A5-B4和2H8-G5 4株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶810、1∶256、1∶512、1∶512,腹水效价分别为1∶(8.6×106)、1∶(2.5×106)、1∶(5×106)和1∶(5×106)。6B5-E4株对SD的半数抑制浓度(IC50)为0.54μg/L。SD mAb与磺胺一甲基嘧啶交叉反应率为2.7%,与其他磺胺类药物无交叉反应性。【结论】获得了抗SD效价高、敏感、特异的mAb,可用于SD残留的快速检测。