香蕉线条病毒衣壳蛋白功能域基因的原核表达及抗血清制备

编号 zgly0001456862

文献类型 期刊论文

文献题名 香蕉线条病毒衣壳蛋白功能域基因的原核表达及抗血清制备

作者 陈秀  饶雪琴  阮小蕾  刘福秀  李华平 

作者单位 博罗县农业科学研究所  华南农业大学植物病毒研究室  海南出入境检验检疫局 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2013年12期

年份 2013 

分类号 S436.68 

关键词 香蕉  香蕉线条病毒  衣壳蛋白功能域基因  原核表达  抗血清 

文摘内容 制备香蕉线条病毒广东分离物(BSV-GD)的抗血清,可为BSV-GD的快速检测和进一步研究BSV编码蛋白的功能提供条件。通过常规分子生物学方法,克隆了BSV-GD衣壳蛋白(Coat protein,CP)功能域基因,构建了该基因的原核表达载体pET28b-CP,并诱导表达了大小约为46.5 kD的融合蛋白His-CP。可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在。利用His标签纯化试剂盒对目的蛋白进行纯化、回收,获得了高纯度的融合蛋白。以纯化的融合蛋白为抗原免疫健康大耳白兔,成功制备了BSV-GD CP功能域基因编码蛋白的兔抗血清。Western-blotting分析表明该抗血清具有很强的特异性,间接ELISA法检测抗血清效价达204 800倍以上,对植物材料的合适检测浓度为1︰1 600~1︰6 400。