DNA重组酶Cre介导载体间基因的重组转移

编号 zgly0000548739

文献类型 期刊论文

文献题名 DNA重组酶Cre介导载体间基因的重组转移

作者 王文棋  盖颖  陆海  李义  蒋湘宁 

作者单位 北京林业大学生命科学与生物技术学院  Laboratory of Transgene 

母体文献 生物化学与生物物理进展 

年卷期 2007,34(11)

页码 1210-1215

年份 2007 

分类号 Q783.2 

关键词 DNA重组酶Cre  基因供体pTLG  基因受体pET-LoxP  gfp基因  绿色荧光菌落 

文摘内容 DNA重组酶Cre可以识别LoxP位点,使含有LoxP位点的DNA分子发生重组：2个同向LoxP之间的DNA片段被删除,2个环状DNA分子被整合为一个大分子.基于Cre酶的这些作用特性,构建了一套载体间基因的重组转移体系,在Cre酶的作用下,gfp基因被从基因供体pTLG上切除下来,然后转移到基因受体pET-LoxP上,从而快速、简便地完成了gfp基因高效表达载体pET-gfp的构建.gfp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中被诱导表达,使菌落产生了可视的绿色荧光.通过对荧光菌落的计数分析,比较了环状基因供体pTLG和线性基因供体pTLG对有效重组率的影响.使繁琐的传统载体构建变为简单的酶促反应,极大地简化了载体构建步骤,为Cre酶在基因克隆和亚克隆中的应用提供了很好的研究基础。