PEG介导的黑附球菌遗传转化体系的建立

编号 zgly0001577744

文献类型 期刊论文

文献题名 PEG介导的黑附球菌遗传转化体系的建立

作者 张雷刚  罗淑芬  周宏胜  胡花丽  李鹏霞 

作者单位 江苏省农业科学院农产品加工研究所  江苏省农业科学院园艺产品产后处理工程实验室 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2018年02期

年份 2018 

分类号 TS201.3 

关键词 PEG介导  黑附球菌  遗传转化  原生质体  工程菌株 

文摘内容 以生防真菌黑附球菌原生质体为受体、潮霉素抗性基因(hph)为筛选标记,应用PEG介导法进行了遗传转化体系的研究。潮霉素敏感性测试结果表明,黑附球菌对潮霉素的耐受浓度为50mg/L。PEG介导的黑附球菌原生质体最佳遗传转化体系为:30℃下用2%裂解酶酶解黑附球菌菌丝2h,过滤收集原生质体,经MTC清洗重悬后将质粒p YF11-hph转化黑附球菌原生质体,在RM培养基中混匀再生;经潮霉素药剂筛选和PCR验证,表明外源基因hph已转入到黑附球菌中并获得稳定表达。本实验成功地建立了稳定的PEG介导的黑附球菌遗传转化体系,为研究其代谢途径、生防机制及构建工程菌株提供了技术保障。