盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定

编号 zgly0001545660

文献类型 期刊论文

文献题名 盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定

作者 张玲玲  战翔  彭喆  时建立  吴晓燕  徐胜男  郑书轩  徐绍建  黄保华  李俊 

作者单位 山东省农业科学院畜牧兽医研究所  山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室  济南市动物卫生监督所 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2017年02期

年份 2017 

分类号 S859.84 

关键词 盐酸克伦特罗  单克隆抗体  残留检测 

文摘内容 为进一步建立克伦特罗(CL)残留检测方法,给制备CL残留检测试剂盒打下基础,进行了CL单克隆抗体(McAb)的制备研究。以重氮反应,将CL与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备免疫原和检测原,并通过杂交瘤技术,获得了5株能稳定分泌特异结合CL小分子的单克隆抗体杂交瘤细胞株(1E9A9、2A9C1、3F2E9、6G2E9、6E10D9)。这5株细胞株经过体外传代培养和冻存复苏后均能稳定分泌抗体。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定的这5株细胞上清液抗体效价分别为1:1.28×10~5、1:5.12×10~5、1:1.28×10~5、1:5.12×10~5、1:2.56×10~5;选用3F2E9、6E10D9细胞株,制备CL单克隆抗体腹水并纯化,其纯化后的腹水抗体效价分别为1:1.28×10~5、1:2.56×10~5,BCA(2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠)方法检测的浓度分别为1.60 mg/mL、1.54 mg/mL;最终通过斑点ELISA(Dot-ELISA)方法测定CL抗原与这2株抗体有较强的结合力。在上述方法的制备及验证下,成功获得了特异性较高的CL单克隆抗体,为进一步研制CL残留检测试剂盒奠定了基础。