构建香菇转化的同源筛选标记的研究

编号 zgly0001689251

文献类型 期刊论文

文献题名 构建香菇转化的同源筛选标记的研究

作者 李菲  章炉军  姜宁  刘建雨  于海龙  尚晓冬  宋春艳  谭琦 

作者单位 上海海洋大学食品学院  上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室 

母体文献 食用菌学报 

年卷期 2019年04期

年份 2019 

分类号 S646.12 

关键词 香菇  萎锈灵抗性基因  同源筛选标记  农杆菌转化  绿色荧光蛋白 

文摘内容 通过比对分析多种导致真菌内源萎锈灵抗性的琥珀酸脱氢酶B亚基(SdhB)氨基酸序列的突变位点,将香菇(Lentinula edodes)SdhB氨基酸序列第243位的组氨酸替换为亮氨酸,构建了香菇萎锈灵抗性同源筛选标记载体,以农杆菌介导转化小米粒培养的香菇菌丝。转化子经5次传代后,PCR扩增验证插入片段,并观察绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况。结果显示:香菇单核体和双核体菌株经转化后,均能筛选到具有萎锈灵抗性的转化子,单核体菌株的转化率为34%,显著高于双核体菌株(4%);单核体转化子中的同源筛选标记及报告基因稳定性较好。本研究构建的萎锈灵抗性同源筛选标记可有效地在香菇遗传转化体系中应用。